La medición de los rangos de ejercicio/capacidad antioxidante de los extractos de comidas y fluidos orgánicos es beneficiosa para calcular el valor dietético de los alimentos y para el análisis, el remedio y el seguimiento de bastantes dolencias relacionadas con el estrés oxidativo.
Biológicamente, los antioxidantes desempeñan sus funciones beneficiosas para la salud mediante la transferencia de un átomo de hidrógeno (H) o un electrón (e(-)) a especies reactivas, desactivándolas. Los ensayos de ejercicio de los antioxidantes imitan este movimiento; es decir, los antioxidantes se miden por su cambio de átomo de H (HAT) o de e(-) (ET) a las moléculas de la sonda.
El ejercicio/capacidad de los antioxidantes puede ser monitorizado por todo tipo de ensayos con mecanismos totalmente diferentes, junto con los ensayos HAT, ET y de modo mixto (ET/HAT), normalmente sin límites distintos entre ellos.
La comprensión de los principales mecanismos, beneficios y desventajas de los ensayos de medición es vital para el número correcto de la técnica para el análisis legítimo de las propiedades antioxidantes en las funciones deseadas.
Este trabajo proporciona una visión básica y actualizada de los ensayos basados en HAT, de modo mixto (ET/HAT) y de peroxidación de lípidos que existen para medir el ejercicio/capacidad antioxidante y la química que hay detrás de ellos, junto con un análisis crucial de sus beneficios y desventajas.
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Se necesitan quenchers eficientes para eliminar la interferencia del sustrato: Cofactor Binding within the HAT Scintillation Proximity Assay.
Las histonas acetiltransferasas (HAT) median el cambio de un grupo acetilo del cofactor, acetil-CoA, al grupo amino de la cadena de aspecto de determinadas lisinas en varios sustratos proteicos, sobre todo las histonas nucleares.
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La desregulación de las HAT está relacionada con bastantes estados de enfermedad. Los ensayos bioquímicos fiables y rápidos para las HAT son cruciales para comprender las capacidades orgánicas de la acetilación de proteínas, además de para el cribado de inhibidores de moléculas pequeñas de las enzimas HAT.
En este informe, presentamos un ensayo de proximidad de centelleo (SPA) para la medición de las acciones enzimáticas HAT. El donante de acetilo fue (3)HAc-CoA, y un péptido de histona modificado con biotina sirvió como sustrato de la HAT.
Tras la respuesta HAT, se añadieron perlas recubiertas de estreptavidina para inducir la proximidad del sustrato acetilado a las moléculas de centelleo. Sin embargo, observamos una fuerte unión inespecífica entre el cofactor y los sustratos de péptidos de histonas, lo que dificultaba la eficacia de la SPA.
| DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library | |
| L1033-.1 | ApexBio |
| DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library | |
| L1033-.25 | ApexBio |
| DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library | |
| L1033-5 | ApexBio |
| T7 DNA | |
| 310-005 | GeneOn |
| T7 DNA | |
| 310-025 | GeneOn |
Para evitar este inconveniente, se evaluó un conjunto de agentes químicos para eliminar la interacción entre el cofactor y el sustrato, ofreciendo así lecturas de SPA fiables. Con la optimización, el SPA confirmó una eficiencia constante y fuerte para la medición del ejercicio de HAT y el análisis de inhibidores de HAT.
En total, este ensayo de mezcla y medida no requiere ningún proceso de lavado, podría ser utilizado dentro del formato de microplaca, y está muy bien adaptado a la detección de alto rendimiento de moduladores químicos HAT.
| Protein G Protein | |||
| Abbexa | |||
| Protein G Protein | |||
| Abbexa | |||
| Protein L Protein | |||
| Abbexa | |||
Investigación comparativa de sondas fluorogénicas sensibles al tiol para ensayos HAT.
Las histonas acetiltransferasas (HAT) catalizan la acetilación de determinados residuos de lisina en proteínas histónicas y no histónicas. Las últimas investigaciones han confirmado que la acetilación está ampliamente distribuida entre las proteínas móviles, lo que sugiere la existencia de diversas capacidades de las HAT en las vías móviles.
Sin embargo, en la actualidad los ensayos para el examen del ejercicio de las HAT son todavía bastante restringidos. Aquí, evaluamos una secuencia de compuestos fluorogénicos sensibles al tiol para la detección de las acciones enzimáticas de varias proteínas HAT. Tras la conjugación con el grupo tiol de HSCoA, estas moléculas adquieren rendimientos cuánticos mejorados y una fluorescencia robusta, lo que permite una cuantificación sencilla de las acciones de HAT.
Hemos investigado y contrastado el rendimiento de los ensayos de estos compuestos fluorogénicos por su funcionalidad como reporteros del ejercicio HAT, junto con la cinética de respuesta con HSCoA, el efecto sobre el ejercicio HAT, y los elementos de amplificación de la fluorescencia.
| Paraffin Wax Dispenser | |||
| Scientific Laboratory Supplies | |||
| Paraffin wax, granular (56 - 60) | |||
| Glentham Life Sciences | |||
| Paraffin wax, granular (56 - 60) | |||
| Glentham Life Sciences | |||
| 8KG Histoplast PE Paraffin | |||
| Scientific Laboratory Supplies | |||
| Paraffin oil, BP, Ph. Eur. grade | |||
| Glentham Life Sciences | |||
Nuestros conocimientos recomiendan que el CPM y el éster del ácido maleico de la cumarina son sondas HAT gloriosas debido a su cinética de respuesta rápida y a la dramática mejora de la fluorescencia a lo largo de la respuesta HAT.
Además, las mediciones en placa de microtitulación presentan que esta estrategia fluorescente es fuerte y muy bien adaptada a la adaptación a la detección de alto rendimiento de los inhibidores de moléculas pequeñas de HAT, destacando el valor de esta técnica de ensayo en el descubrimiento de nuevos fármacos.
| MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit | |||
| Bioingentech | |||
| MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit | |||
| Bioingentech | |||
| PCR Mix | |||
| Biochain | |||
| PCR SuperMix | |||
| Abbexa | |||
| PCR Enhancer | |||
| Vazyme | |||
Opisthorchis viverrini y Haplorchis taichui: mejora de un ensayo de PCR multiplex para su detección y diferenciación utilizando cebadores particulares derivados de HAT-RAPD.
Se han investigado cebadores particulares para la detección de Opisthorchis viverrini y Haplorchis taichui mediante el uso de la técnica de PCR HAT-RAPD. Se han realizado catorce cebadores arbitrarios (Operon Applied sciences) para la era de perfiles de ADN polimórficos.
Los resultados confirmaron que un fragmento de 319 pb generado a partir del cebador OPA-04 era específico de O. viverrini, mientras que un fragmento de 256 pb generado a partir del cebador OPP-11 era específico de H. taichui.
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| EF019186 | Lifescience Market |
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| Kl ELISA Kit| Rat Klotho ELISA Kit | |
| EF017474 | Lifescience Market |
| LN ELISA Kit| Rat Laminin ELISA Kit | |
| EF017041 | Lifescience Market |
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| EF017074 | Lifescience Market |
Basándose en el conocimiento de cada secuencia, se diseñaron dos pares de cebadores particulares y las secuencias de cada cebador fueron las siguientes; H. taichui; Hapt_F5′-GGCCAACGCAATCGTCATCC-3’y Hapt_R1 5′-CTCTCGACCTCCTCTAGAAT-3′ que dieron un producto de PCR de 170 pb.
Para O. viverrini, OpV-1F: 5′-AATCGGCTGCATATTGACCGAT-3′ y OpV-1R: 5′-CGGTTGCTTATTGCAGACAA-3′ que generaron un producto de PCR de 319 pb. Se examinó la eficacia y la detección particular de estos cebadores en todas las muestras de ADN de los parásitos.
Los resultados confirmaron que se han generado mercancías de PCR particulares de 170 y 319 pb, como plomo constructivo para H. taichui y O. viverrini, respectivamente, al no tener reacción cruzada con ningún parásito examinado.
Las situaciones de PCR son beneficiosas a 68°C de temperatura de recocido y con 0,5 mM de cloruro de magnesio (Mg Cl(2)). Además, los cebadores particulares desarrollados en este examen han sido eficaces para averiguar la presencia de cada parásito en peces y caracoles huéspedes intermedios, a los que se añadió artificialmente el ADN de O. viverrini, ya que no suele estar presente en el norte de Tailandia.
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Los cebadores específicos de H. taichui y O. viverrini desarrollados eficazmente en este examen podrían utilizarse para la vigilancia epidemiológica, la administración de parásitos y los paquetes de gestión.
Detección heterogénea de enzimas de modificación postraduccional integrando el beneficio de la evaluación homogénea
La evaluación heterogénea tiene buenas perspectivas de utilidad dentro de la detección de enzimas de modificación postraduccional (PTM) con los beneficios de la mejora de la señal, una demanda mucho menor de patrones y una sensibilidad y selectividad excesivas.
Sin embargo, tan pronto como el sustrato se montó en una interfaz fuerte, el impedimento estérico posiblemente restringir la aproximación de corazón catalítico al sustrato, disminuyendo así la eficacia de PTM.
En este sentido, se ha demostrado que la interfaz modificada con avidina podría utilizarse para desarrollar plataformas de detección heterogéneas con sustratos marcados con biotina como sondas, en las que la PTM enzimática se lleva a cabo en la respuesta y el ensayo heterogéneo se lleva a cabo en un suelo fuerte.
La técnica de detección integra las ventajas pero supera los defectos de cada uno de los ensayos homogéneos y heterogéneos. La proteína quinasa A (PKA) y la histona acetiltransferasa (HAT) se han decidido porque los ejemplos mediante el uso de sustratos de péptidos específicos de la secuencia.
| test product | |
| 22332 | National Diagnostics |
| new product test | |
| 23432342 | National Diagnostics |
| Test productt 2 | |
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| Diogenes Kit | |
| NAT1000 | National Diagnostics |
| Hydrogen Peroxide Assay Kit | |
| NAT1002 | National Diagnostics |
Las modificaciones de signo se han monitorizado mediante un ensayo colorimétrico basado en HRP y resonancia de plasmón de suelo amplificada por anticuerpos (SPR). Las estrategias se han utilizado para la evaluación de lisados celulares y el análisis de la eficacia de la inhibición con resultados aceptables.
La técnica puede utilizarse para la detección de una amplia gama de enzimas orgánicas y proporcionar un nuevo concepto para el diseño de diversos biosensores heterogéneos. Por lo tanto, este trabajo debe ser de gran importancia para la popularización y la utilidad sensible de los biosensores.
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| NAT1000 | National Diagnostics |
